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01.09.2009 | Original Article | Ausgabe 9/2009

Archives of Virology 9/2009

An improved reverse transcription loop-mediated isothermal amplification assay for sensitive and specific detection of Newcastle disease virus

Zeitschrift:
Archives of Virology > Ausgabe 9/2009
Autoren:
Qiang Li, Chunyi Xue, Jianping Qin, Qingfeng Zhou, Feng Chen, Yingzuo Bi, Yongchang Cao

Abstract

Five of 21 different Newcastle disease virus (NDV) strains isolated from China in 2007 gave false-negative results when detected with a previously reported loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method, and mismatches were found between the target gene and LAMP primers. Therefore, an improved, sensitive, specific, and accelerated one-step reverse transcription (RT)-LAMP assay with degenerate primers was developed. Our data demonstrated that the improved RT-LAMP assay detected all 21 NDV isolates, had no cross-reaction with three other avian viruses, could be performed in 50 min less time, was 5-fold more sensitive than the previous LAMP assay, and achieved 96.8% sensitivity with 62 samples, including 30 field clinical samples, 24 experimentally infected samples, and 8 experimentally negative samples. Therefore, the improved RT-LAMP assay is a simple, rapid, and cost-effective method that is practical for less well-equipped laboratories and in the field.

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