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01.12.2012 | Methodology | Ausgabe 1/2012 Open Access

Malaria Journal 1/2012

Comparison of the absolute and relative efficiencies of electroporation-based transfection protocols for Plasmodium falciparum

Zeitschrift:
Malaria Journal > Ausgabe 1/2012
Autoren:
Sandra Hasenkamp, Karen T Russell, Paul Horrocks
Wichtige Hinweise

Electronic supplementary material

The online version of this article (doi:10.​1186/​1475-2875-11-210) contains supplementary material, which is available to authorized users.

Competing interests

The authors declare that they have no competing interests.

Authors’ contributions

PH and SH designed the study, analysed the data and prepared the manuscript. SH and KR carried out the experiments. All authors read and approved the final manuscript.

Abstract

Background

Several electroporation protocols exist to transfect exogenous DNA into Plasmodium falciparum. To date, however, only a subjective analysis of their relative efficiencies has been reported.

Methods

A time-course of luciferase reporter expression is used to provide an objective quantitative analysis of the absolute efficiency of three electroporation techniques; direct electroporation of ring stage infected erythrocytes, preloading of erythrocytes and a novel “double-tap” protocol that combines both approaches.

Results

Preloading of erythrocytes shows a mean efficiency of 9.59x10-6, some 5–180 fold more efficient than matched experiments utilizing the “double-tap” and direct electroporation of ring stage infected erythrocytes alone, respectively.

Conclusion

Evidence presented here provides the first quantitative assessment of both the absolute and relative efficiencies of a key molecular tool used to study the biology and pathogenesis of this important human pathogen.
Zusatzmaterial
Authors’ original file for figure 1
12936_2012_2122_MOESM1_ESM.pdf
Literatur
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