Autoantikörper gegen Zellkerne

Autoantikörper gegen Zellkerne; ANA; ANF (antinukleäre Faktoren)

antinuclear autoantibodies

Autoantikörper, die sich gegen Antigene des Zellkerns richten. Bei der Bezeichnung dieser Autoantigene hat man sich entweder nach biochemischen Merkmalen gerichtet (DNA, Histone, Ribonukleoproteine: RNP) oder nach mit den Autoantikörpern assoziierten Krankheiten (SS-A, SS-B: Sjögren-Syndrom, Antigene A und B; PM-Scl: Polymyositis, progressive Systemsklerose), manchmal aber auch nach dem Namen der Patienten, bei denen die Antikörper zuerst beschrieben wurden (Sm, Ro, La) (s. folgende Tabelle).

Autoantigene des Zellkerns:

Die Bedeutung der Zellkernantikörper ist zwar für die Diagnostik vieler Autoimmunkrankheiten gut belegt, ihre Rolle in der Pathogenese ist aber, abgesehen beispielsweise von den Autoantikörpern gegen Doppelstrang-DNA, in den meisten Fällen noch unklar.

Serum, Plasma, Liquor.

Autoantikörper sind bei +4 °C bis zu 2 Wochen lang beständig, bei −20 °C über Monate und Jahre hinweg.

Goldstandard für die Bestimmung der Autoantikörper gegen Zellkerne (ANA) ist der indirekte Immunfluoreszenztest (IIFT, Immunfluoreszenz, indirekte) mit humanen Epithelzellen (HEp-2) und Primatenleber (s. folgende Abbildungen), der für seine hohe Spezifität bekannt ist – positive und negative Proben ergeben einen großen Signalunterschied, weil man bei der mikroskopischen Auswertung genau feststellen kann, wie sich ein Indikator-Farbstoff (in der Regel Fluoreszein) in einem Gewebe oder in Zellen verteilt. Für jeden gebundenen Autoantikörper ergibt sich ein typisches Fluoreszenzmuster, je nach Lokalisation der einzelnen Autoantigene.

Autoantikörper gegen Zellkerne, indirekte Immunfluoreszenz mit Substrat HEp-2-Zellen (Muster homogen):

Autoantikörper gegen Zellkerne, indirekte Immunfluoreszenz mit Substrat Primatenleber (Muster homogen):

Bei einem positiven Resultat setzt man zur endgültigen Differenzierung Testsubstrate mit definierten Einzelantigenen, wie Enzymimmunoassay, (Enzyme-linked Immunosorbentassay, Chemilumineszenz-Immunoassay) oder Immunblot (Linienblot) ein. Die alleinige Verwendung dieser monospezifischen Testmethoden reicht für die Bestimmung der Autoantikörper gegen Zellkerne nicht aus, da bisher nicht alle relevanten Antigene in aufgereinigter Form verfügbar sind. Auch zur Kontrolle ihrer Plausibilität ist immer ein IIFT parallel zu monospezifischen Tests durchzuführen.

Negativ.

Autoantikörper gegen Zellkerne (ANA) im Serum von Patienten sind ein charakteristischer Befund bei vielen Erkrankungen, vor allem (aber nicht ausschließlich) des rheumatischen Formenkreises. Die folgende Tabelle gibt eine Übersicht über die im Vordergrund stehenden Erkrankungen.

ANA-Prävalenz bei ausgewählten Krankheiten:

Der Nachweis von ANA stellt für viele Autoimmunerkrankungen ein wesentliches Diagnostikum dar. Antikörper gegen nukleäre Antigene sind gegen verschiedene Zellkernbestandteile (biochemische Substanzen des Zellkerns) gerichtet. Diese umfassen die Nukleinsäuren, Zellkernproteine und Ribonukleoproteine. Die Häufigkeit antinukleärer Antikörper bei entzündlichen rheumatischen Erkrankungen liegt zwischen 20 und 100 %. Folglich ist die differenzierte Antikörperdiagnostik gegen nukleäre Antigene zur Identifizierung der einzelnen rheumatischen Erkrankungen und zur Abgrenzung gegenüber anderen Autoimmunerkrankungen unabdingbar.

Beim systemischen Lupus erythematodes (SLE; Synonym: Lupus erythematodes disseminatus, LED) gilt der Nachweis der Autoantikörper gegen Doppelstrang-DNA als wichtigstes Kriterium für die Diagnose (s. folgende Tabelle).

Autoantikörper bei systemischem Lupus erythematodes:

Immunkomplexe aus Doppelstrang-DNA und entsprechenden Autoantikörpern verursachen Gewebeschäden in Subkutis, Nieren und anderen Organen. Der Antikörpertiter korreliert mit der Krankheitsaktivität. Ebenso gelten Autoantikörper gegen Sm als pathognomonisch für den SLE. Daneben sind bei dieser Krankheit Autoantikörper gegen weitere Polynukleotide, Ribonukleotide, Histone und andere Antigene des Zellkerns nachweisbar.

Beim medikamenteninduzierten Lupus erythematodes mit den Symptomen Arthralgien, Arthritis, Exanthem, Serositis, Myalgien, Leber- und Milzvergrößerung treten konstant Autoantikörper gegen Histone auf. Diese reversible Form des SLE kann ausgelöst werden durch Antibiotika (z. B. Penicillin, Streptomycin, Tetracycline), Chemotherapeutika (z. B. INH, Sulfonamide), Antiepileptika (z. B. Phenytoin, Hydantoine), Antiarrhythmika (z. B. Procainamid, Practolol), Antihypertensiva (z. B. Reserpin, Hydralazin), Psychopharmaka (z. B. Chlorpromacin), Thyreostatika (z. B. Thiouracilderivate), antirheumatische Basistherapeutika (z. B. Gold, D-Penicillamin) und andere wie z. B. Kontrazeptiva und Allopurinol.

Beim Sharp-Syndrom („mixed connective tissue disease“, MCTD; Mischkollagenose) sind hohe Titer an Autoantikörper gegen U1-RNP charakteristisch. Der Antikörpertiter korreliert mit der Krankheitsaktivität (s. folgende Tabelle).

Autoantikörper beim Sharp-Syndrom (Mischkollagenosen, MCTD):

Bei rheumatoider Arthritis werden bei bis zur Hälfte der Patientenseren Autoantikörper gegen Histone festgestellt, seltener finden sich Titer gegen U1-nRNP. Antikörper gegen RANA („rheumatoid arthritis nuclear antigen“) sind mit HEp-2-Zellen nicht nachweisbar (s. folgende Tabelle).

Zellkern-Autoantikörper bei rheumatoider Arthritis:

Die progressive Systemsklerose (progressive systemische Sklerodermie, PSS; Sklerodermie) kann sich in 2 nicht immer eindeutig gegeneinander abgrenzbaren Formen manifestieren. Bisher wurden bei der diffusen Form vor allem Autoantikörper gegen Scl-70 sowie Autoantikörper gegen RNA-Polymerase III (RP11, RP155) und Fibrillarin beobachtet. Autoantikörper gegen Zentromere (CENP-A, CENP-B) sind mit der limitierten Form der PSS assoziiert (s. folgende Tabelle und Abbildung).

Zellkern-Autoantikörper bei progressiver Systemsklerose:

Klinische Erscheinungsformen der progressiven Systemsklerose und assoziierte Autoantigene (s. a. Myositis-spezifische Autoantikörper):

Autoantikörper gegen PM-Scl treten bei Polymyositis und Dermatomyositis auf. Auch andere Zellkern-Antikörper (Mi-2, Ku) und Autoantikörper gegen Jo-1 (Autoantikörper gegen Aminoacyl-t-RNS-Synthetase) können bei diesen Erkrankungen nachgewiesen werden (s. folgende Tabelle).

Zellkern-Autoantikörper bei Polymyositis und Dermatomyositis:

Beim primären Sjögren-Syndrom treten Autoantikörper gegen SS-A und Autoantikörper gegen SS-B auf, vorwiegend miteinander kombiniert. Zusätzlich können Autoantikörper gegen Speicheldrüsenausführungsgänge bei 40–60 % der Fälle vorliegen (s. folgende Tabelle).

Zellkern-Autoantikörper bei Sjögren-Syndrom:

Neben Autoantikörper gegen Mitochondrien sind mit der primär biliären Cholangitis eine Reihe von Autoantikörpern gegen Zellkerne assoziiert, die teilweise als pathognomonisch anzusehen sind; s. a. PBC-assoziierte antinukleäre Autoantikörper (PBCNA). Darüber hinaus findet man bei PBC auch häufig Autoantikörper gegen SS-A und Autoantikörper gegen Zentromere, die beide, wie auch die Autoantikörper gegen Glykoprotein 210, auf eine ungünstigere Prognose hinweisen (s. folgende Tabelle).

Zellkern-Autoantikörper bei primär biliärer Cholangitis:

Auch bei subjektiv gesund erscheinenden Personen können Autoantikörper gegen Zellkerne nachgewiesen werden, mit einer Prävalenz von 5 % und meistens niedrigen Titern. Die wichtigsten mit Autoantikörpern gegen Zellkerne assoziierten Krankheiten fasst Tab. 1 zusammen.

Autoantikörper gegen DFS70 reagieren ebenfalls mit HEp-2-Zellen im IIFT und verursachen ein dicht feingranuläres Fluoreszenzmuster im Nukleoplasma, das vom homogenen und granulären Muster anderer ANA unterschieden werden muss. Die Antikörper sind nicht krankheitsspezifisch und treten auch bei Gesunden auf. Ein positiver Anti-DFS70-Befund kann aber zumindest einen Teil der ANA-Muster im indirekten Immunfluoreszenztest erklären, die keinen krankheitsrelevanten ANA zugeordnet werden können.

Antikörper gegen Bestandteile des Zytoplasmas der HEp-2-Zellen sind am Immunfluoreszenzmuster nicht immer eindeutig differenzierbar. Nur wenige Zytoplasma-reaktive Antikörper lassen sich einer bestimmten Krankheit zuordnen – unter anderem Autoantikörper gegen Mitochondrien bei primär biliärer Cholangitis und gegen die Proteine PL-7 und PL-12 bei Polymyositis und Dermatomyositis. Weitere seltene Antikörper bei Polymyositis sind gegen u. a. OJ, EJ und Signal-Erkennungspartikel gerichtet. Andere zytoplasmatische Antikörper wie z. B. gegen Ribosomen, Golgi-Apparat, Lysosomen und Zytoskelettanteile wie Actin (Autoantikörper gegen glatte Muskulatur), Vimentin (Autoantikörper gegen Sa) oder Zytokeratine sind von untergeordneter klinischer Bedeutung. Auch der diagnostische Nutzen Mitose-assoziierter Antigene (Autoantikörper gegen Mitose-assoziierte Antigene) ist noch nicht endgültig geklärt. Die Zusammenschau der aufgeführten Argumente belegt die herausragende immunologische Relevanz und den damit verbundenen diagnostischen Wert der Autoantikörper gegen Zellkerne.