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01.01.2012 | Original Research Paper | Ausgabe 1/2012

Inflammation Research 1/2012

Mast cells cultured from IL-3-treated mice show impaired responses to bacterial antigen stimulation

Zeitschrift:
Inflammation Research > Ausgabe 1/2012
Autoren:
Krisztina V. Vukman, Tamás Visnovitz, Paul N. Adams, Martin Metz, Marcus Maurer, Sandra M. O’Neill
Wichtige Hinweise
Responsible Editor: Andras Falus.

Abstract

Objective and design

This study exploits the biological activity of interleukin (IL)-3 to generate high yields of peritoneal mast cells ex vivo in order to examine pro-inflammatory immune responses in ex-vivo culture.

Material or subjects

Mast cells were obtained from the peritoneal cavity of C57BL/6 mice.

Treatment

Mice were injected intraperitoneally twice per day for 5 days with IL-3 (40–50 μg/ml) to increase mast cell numbers.

Methods

Histological studies examined mast cell numbers in the peritoneal cavity, intestine, lung, spleen and skeletal muscle. Peritoneal mast cells cultured ex vivo (PCMCs) were stimulated for 24 h with lipopolysaccharide and Bordetella pertussis antigen and secretion of tumour necrosis factor-α, IL-6, IL-4, IL-5, IL-10 and interferon-γ into supernatant was measured by commercial ELISA. Cell surface marker expression of FcεRI, c-kit, OX40L and TLR2 was measured by flow cytometry. Mast cell degranulation was measured using a β-hexosaminidase assay.

Results

IL-3 treatment increases mast cell numbers in the peritoneal cavity, spleen and muscle but not intestine and lung of C57BL/6 mice. PCMCs generated from IL-3-treated mice exhibit impaired growth, differentiation and responses to activation as measured by decreased cytokine secretion and cell surface marker expression.

Conclusion

Mast cells cultured from IL-3-treated mice show impaired responses.

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