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18.08.2017 | Original Article | Ausgabe 5/2017

Immunologic Research 5/2017

Recycling endosomes in human cytotoxic T lymphocytes constitute an auxiliary intracellular trafficking pathway for newly synthesized perforin

Zeitschrift:
Immunologic Research > Ausgabe 5/2017
Autoren:
Kelsey Lesteberg, Jordan Orange, George Makedonas
Wichtige Hinweise

Electronic supplementary material

The online version of this article (doi:10.​1007/​s12026-017-8945-8) contains supplementary material, which is available to authorized users.

Abstract

Although cytotoxic T lymphocytes (CTLs) store perforin within cytoplasmic secretory granules for immediate use, perforin is synthesized anew within hours of TCR stimulation. Previously, we observed new perforin protein at an immunologic synapse independent of secretory lysosomes; herein, we aimed to determine how new perforin transits to the synapse if not via lytic granules. We analyzed antigen-specific human CTLs via imaging flow cytometry and high-resolution confocal microscopy, with attention to intracellular trafficking components and new perforin. The recycling endosome compartments identified by rab8, rab11a, rab4, and rab37 co-localized with new perforin, as well as the SNAREs vti1b and VAMP4. After ablating the function of the recycling endosome pathway, we observed a relative accumulation of new perforin in rab8 vesicles. The recycling endosome pathway may serve as an auxiliary intracellular route for the delivery of new perforin to an immunologic synapse in order to perpetuate a cytotoxic response.

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Literatur
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