nach oben

Erschienen in:

01.10.2011 | Original Article

Silencing of the HCCR2 Gene Induces Apoptosis and Suppresses the Aggressive Phenotype of Hepatocellular Carcinoma Cells in Culture

verfasst von: Jun Guo, Liuqin Yang, Yafei Zhang, Jun Wang, Shunmei Wan, Shihai Xia, Shiming Yang, Rongquan Wang, Dianchun Fang

Erschienen in: Journal of Gastrointestinal Surgery | Ausgabe 10/2011

Einloggen, um Zugang zu erhalten

Abstract

Background

The human cervical cancer oncogene HCCR-2 is overexpressed in various malignant tumors and cell lines, and might function as a negative regulator of the p53 tumor suppressor. Here, we used RNA interference strategies to evaluate the role of HCCR-2 in liver cancer, and to explore its potential therapeutic effect.

Methods

Changes of HepG2 cells stably transfected by an HCCR-2 RNA interference vector were detected by real-time PCR, MTT staining, plate colony formation, flow cytometry, and cell migration experiments. Apoptosis-related protein Bcl-2 and Bax levels were measured by Western blot.

Results

Our results showed that of the three siRNA-expressing vectors, siRNA-H3 had a suppressive effect on the expression of HCCR-2 mRNA, interfering with proliferation and migration of HCCR-2. Moreover, the apoptotic rate also increased, and cells transfected by siRNA-H3 were blocked in the G0/G1 stage. Plate colony formation experiments demonstrated that the single cell clone formation capacity of HepG2-H3 cells was clearly lower than that of HepG2 and HepG2-N cells. Western blot results indicated that the expression of Bcl-2 was inhibited, and the expression of Bax was increased.

Conclusions

In summary, RNAi targeting HCCR-2 could be an effective means for suppressing malignant features of hepatocellular carcinoma cells.

Parkin DM, Bray F, Ferlay J, Pisani P. Estimating the world cancer burden: Globocan 2000. Int J Cancer 2001;94(2):153–156.PubMedCrossRef

Llovet JM, Burroughs A, Bruix J. Hepatocellular carcinoma. Lancet 2003;362(9399):1907–1917.PubMedCrossRef

Altekruse SF, McGlynn KA, Reichman ME. Hepatocellular carcinoma incidence, mortality, and survival trends in the United States from 1975 to 2005. J Clin Oncol 2009;27(9):1485–1491.PubMedCrossRef

Poon D, Anderson BO, Chen LT, Tanaka K, Lau WY, Van Cutsem E, Singh H, Chow WC, Ooi LL, Chow P, Khin MW, Koo WH; Asian Oncology Summit. Management of hepatocellular carcinoma in Asia: consensus statement from the Asian Oncology Summit 2009. Lancet Oncol 2009;10(11):1111–1118.PubMedCrossRef

Blum HE. Hepatocellular carcinoma: therapy and prevention. World J Gastroenterol 2005;11(47):7391–7400.PubMed

Schwartz MA. Integrins, oncogenes, and anchorage independence. J Cell Biol 1997;139(3):575–578.PubMedCrossRef

Frisch SM, Ruoslahti E. Integrins and anoikis. Curr Opin Cell Biol 1997;9(5):701–706.PubMedCrossRef

Douma S, Van Laar T, Zevenhoven J, Meuwissen R, Van Garderen E, Peeper DS. Suppression of anoikis and induction of metastasis by the neurotrophic receptor TrkB. Nature 2004;430(7003):1034–1039.PubMedCrossRef

Wewer UM, Shaw LM, Albrechtsen R, Mercurio AM. The integrin alpha 6 beta 1 promotes the survival of metastatic human breast carcinoma cells in mice. Am J Pathol 1997;151(5):1191–1198.PubMed

10.

Smit MA, Geiger TR, Song JY, Gitelman I, Peeper DS. A Twist-Snail axis critical for TrkB-induced epithelial-mesenchymal transition-like transformation, anoikis resistance, and metastasis. Mol Cell Biol 2009;29(13):3722–3737.PubMedCrossRef

11.

Cao L, Han L, Zhang Z, Li J, Qu Z, Du J, Liang X, Liu Y, Liu H, Shi Y, Liu S, Gao L, Sun W. Involvement of anoikis-resistance in the metastasis of hepatoma cells. Exp Cell Res 2009;315(7):1148–1156.PubMedCrossRef

12.

Ko J, Lee YH, Hwang SY, Lee YS, Shin SM, Hwang JH, Kim J, Kim YW, Jang SW, Ryoo ZY, Kim IK, Namkoong SE, Kim JW. Identification and differential expression of novel human cervical cancer oncogene HCCR-2 in human cancers and its involvement in p53 stabilization. Oncogene 2003;22(30):4679–4689.PubMedCrossRef

13.

Chung YJ, Kim JW. Novel oncogene HCCR: its diagnostic and therapeutic implications for cancer. Histol Histopathol 2005;20(3):999–1003.PubMed

14.

Ko J, Shin SM, Oh YM, Lee YS, Ryoo ZY, Lee YH, Na DS, Kim JW. Transgenic mouse model for breast cancer: induction of breast cancer in novel oncogene HCCR-2 transgenic mice. Oncogene 2004;23(10):1950–1953.PubMedCrossRef

15.

Jung SS, Park HS, Lee IJ, Namkoong H, Shin SM, Cho GW, Ha SA, Park YG, Lee YS, Ko J, Kim JW. The HCCR oncoprotein as a biomarker for human breast cancer. Clin Cancer Res 2005;11(21):7700–7708.PubMedCrossRef

16.

Yoon SK, Lim NK, Ha SA, Park YG, Choi JY, Chung KW, Sun HS, Choi MJ, Chung J, Wands JR, Kim JW. The human cervical cancer oncogene protein is a biomarker for human hepatocellular carcinoma. Cancer Res 2004;64(15):5434–5441.PubMedCrossRef

17.

Ha SA, Lee YS, Shin SM, Kim HK, Kim S, Namkoong H, Kim HJ, Jung SM, Lee YS, Chung YJ, Jung SS, Kim JW. Oncoprotein HCCR-1 expression in breast cancer is well correlated with known breast cancer prognostic factors including the HER2 overexpression, p53 mutation, and ER/PR status. BMC Cancer 2009;9:51.PubMedCrossRef

18.

Bourguignon LY, Zhu H, Zhou B, Diedrich F, Singleton PA, Hung MC. Hyaluronan promotes CD44v3-Vav2 interaction with Grb2-p185(HER2) and induces Rac1 and Ras signaling during ovarian tumor cell migration and growth. J Biol Chem 2001;276(52): 48679–48692.PubMedCrossRef

19.

Derksen PW, Liu X, Saridin F, van der Gulden H, Zevenhoven J, Evers B, van Beijnum JR, Griffioen AW, Vink J, Krimpenfort P, Peterse JL, Cardiff RD, Berns A, Jonkers J. Somatic inactivation of E-cadherin and p53 in mice leads to metastatic lobular mammary carcinoma through induction of anoikis resistance and angiogenesis. Cancer Cell 2006;10(5):437–449.PubMedCrossRef

20.

Mehlen P, Puisieux A. Metastasis: a question of life or death. Nat Rev Cancer 2006;6(6):449–458.PubMedCrossRef

21.

Valentijn AJ, Zouq N, Gilmore AP. Anoikis. Biochem Soc Trans 2004;32(Pt3):421–425.

22.

Martinou JC, Green DR. Breaking the mitochondrial barrier. Nat Rev Mol Cell Biol 2001;2(1):63–67.PubMedCrossRef

23.

Gilmore AP, Metcalfe AD, Romer LH, Streuli CH. Integrin-mediated survival signals regulate the apoptotic function of Bax through its conformation and subcellular localization. J Cell Biol 2000;149(2):431–446.PubMedCrossRef

24.

Yamaguchi H, Wang HG. Bcl-XL protects BimEL-induced Bax onformational change and cytochrome C release independent of interacting with Bax or BimEL. J Biol Chem 2002;277(44):41604–41612.PubMedCrossRef

25.

Owens TW, Valentijn AJ, Upton JP, Keeble J, Zhang L, Lindsay J, Zouq NK, Gilmore AP. Apoptosis commitment and activation of mitochondrial Bax during anoikis is regulated by p38MAPK. Cell Death Differ 2009;16(11):1551–1562.PubMedCrossRef

26.

Danial NN, Korsmeyer SJ. Cell death: critical control points. Cell 2004;116(2):205–219.PubMedCrossRef

27.

Cho GW, Shin SM, Kim HK, Ha SA, Kim S, Yoon JH, Hur SY, Kim TE, Kim JW. HCCR-1, a novel oncogene, encodes a mitochondrial outer membrane protein and suppresses the UVC-induced apoptosis. BMC Cell Biol 2007;8:50.PubMedCrossRef

28.

Grossmann J. Molecular mechanisms of “detachment-induced apoptosisd Anoikis”. Apoptosis 2002;7(3):247–260.PubMedCrossRef

29.

Reddig PJ, Juliano RL. Clinging to life: cell to matrix adhesion and cell survival. Cancer Metastasis Rev 2005;24(3):425–439.PubMedCrossRef

30.

Ravid D, Maor S, Werner H, Liscovitch M. Caveolin-1 inhibits cell detachment-induced p53 activation and anoikis by upregulation of insulin-like growth factor-I receptors and signaling. Oncogene 2005;24(8):1338–1347.PubMedCrossRef

31.

Cheng H, Liu P, Wang ZC, Zou L, Santiago S, Garbitt V, Gjoerup OV, Iglehart JD, Miron A, Richardson AL, Hahn WC, Zhao JJ. SIK1 couples LKB1 to p53-dependent anoikis and suppresses metastasis. Sci Signal 2009;2(80):ra35.

Titel: Silencing of the HCCR2 Gene Induces Apoptosis and Suppresses the Aggressive Phenotype of Hepatocellular Carcinoma Cells in Culture
verfasst von: Jun Guo
Liuqin Yang
Yafei Zhang
Jun Wang
Shunmei Wan
Shihai Xia
Shiming Yang
Rongquan Wang
Dianchun Fang
Publikationsdatum: 01.10.2011
Verlag: Springer-Verlag
Erschienen in: Journal of Gastrointestinal Surgery / Ausgabe 10/2011
Print ISSN: 1091-255X
Elektronische ISSN: 1873-4626
DOI: https://doi.org/10.1007/s11605-011-1633-4

Neu im Fachgebiet Chirurgie

Wie erfolgreich ist eine Re-Ablation nach Rezidiv?

23.04.2024 Ablationstherapie Nachrichten

Nach der Katheterablation von Vorhofflimmern kommt es bei etwa einem Drittel der Patienten zu Rezidiven, meist binnen eines Jahres. Wie sich spätere Rückfälle auf die Erfolgschancen einer erneuten Ablation auswirken, haben Schweizer Kardiologen erforscht.

Hinter dieser Appendizitis steckte ein Erreger

23.04.2024 Appendizitis Nachrichten

Schmerzen im Unterbauch, aber sonst nicht viel, was auf eine Appendizitis hindeutete: Ein junger Mann hatte Glück, dass trotzdem eine Laparoskopie mit Appendektomie durchgeführt und der Wurmfortsatz histologisch untersucht wurde.

Mehr Schaden als Nutzen durch präoperatives Aussetzen von GLP-1-Agonisten?

23.04.2024 Operationsvorbereitung Nachrichten

Derzeit wird empfohlen, eine Therapie mit GLP-1-Rezeptoragonisten präoperativ zu unterbrechen. Eine neue Studie nährt jedoch Zweifel an der Notwendigkeit der Maßnahme.

Ureterstriktur: Innovative OP-Technik bewährt sich

19.04.2024 EAU 2024 Kongressbericht

Die Ureterstriktur ist eine relativ seltene Komplikation, trotzdem bedarf sie einer differenzierten Versorgung. In komplexen Fällen wird dies durch die roboterassistierte OP-Technik gewährleistet. Erste Resultate ermutigen.

Update Chirurgie

Bestellen Sie unseren Fach-Newsletter und bleiben Sie gut informiert.

Newsletter bestellen

Aktuelle BDC Leitlinien-Webinare

S3-Leitlinie „Diagnostik und Therapie des Karpaltunnelsyndroms“

Karpaltunnelsyndrom BDC Leitlinien Webinare

CME: 2 Punkte

Das Karpaltunnelsyndrom ist die häufigste Kompressionsneuropathie peripherer Nerven. Obwohl die Anamnese mit dem nächtlichen Einschlafen der Hand (Brachialgia parästhetica nocturna) sehr typisch ist, ist eine klinisch-neurologische Untersuchung und Elektroneurografie in manchen Fällen auch eine Neurosonografie erforderlich. Im Anfangsstadium sind konservative Maßnahmen (Handgelenksschiene, Ergotherapie) empfehlenswert. Bei nicht Ansprechen der konservativen Therapie oder Auftreten von neurologischen Ausfällen ist eine Dekompression des N. medianus am Karpaltunnel indiziert.

Prof. Dr. med. Gregor Antoniadis

S2e-Leitlinie „Distale Radiusfraktur“

Radiusfraktur BDC Leitlinien Webinare

CME: 2 Punkte

Das Webinar beschäftigt sich mit Fragen und Antworten zu Diagnostik und Klassifikation sowie Möglichkeiten des Ausschlusses von Zusatzverletzungen. Die Referenten erläutern, welche Frakturen konservativ behandelt werden können und wie. Das Webinar beantwortet die Frage nach aktuellen operativen Therapiekonzepten: Welcher Zugang, welches Osteosynthesematerial? Auf was muss bei der Nachbehandlung der distalen Radiusfraktur geachtet werden?

PD Dr. med. Oliver Pieske

Dr. med. Benjamin Meyknecht

S1-Leitlinie „Empfehlungen zur Therapie der akuten Appendizitis bei Erwachsenen“

Appendizitis BDC Leitlinien Webinare

CME: 2 Punkte

Inhalte des Webinars zur S1-Leitlinie „Empfehlungen zur Therapie der akuten Appendizitis bei Erwachsenen“ sind die Darstellung des Projektes und des Erstellungswegs zur S1-Leitlinie, die Erläuterung der klinischen Relevanz der Klassifikation EAES 2015, die wissenschaftliche Begründung der wichtigsten Empfehlungen und die Darstellung stadiengerechter Therapieoptionen.

Dr. med. Mihailo Andric

Springer Medizin

Abstract

Background

Methods

Results

Conclusions

Bitte loggen Sie sich ein, um Zugang zu diesem Inhalt zu erhalten

Weitere Artikel der Ausgabe 10/2011

Ischemic Preconditioning-Like Effect of Polyunsaturated Fatty Acid-Rich Diet on Hepatic Ischemia/Reperfusion Injury

Liver Abscess After Liver Metastasectomy is a Poor Prognostic Factor in Patients with Colorectal Cancer

Sentinel Lymph Node Biopsy in Esophageal Cancer: Should It Be Standard of Care?

Pseudoaneurysm of the Hepatic Artery

Laparoscopic Treatment of Epiphrenic Diverticula: Preoperative Evaluation and Surgical Technique. How I Do It

Advances in the Etiology and Management of Hyperinsulinemic Hypoglycemia After Roux-en-Y Gastric Bypass

Update Chirurgie