Skip to main content
main-content

01.12.2014 | Fertility Preservation | Ausgabe 12/2014

Journal of Assisted Reproduction and Genetics 12/2014

Effects of neutral red assisted viability assessment on the cryotolerance of isolated bovine preantral follicles

Zeitschrift:
Journal of Assisted Reproduction and Genetics > Ausgabe 12/2014
Autoren:
A. Langbeen, E.P.A. Jorssen, N. Granata, E. Fransen, J.L.M.R. Leroy, P.E.J. Bols
Wichtige Hinweise
Capsule Applied at a concentration of 15 μg/ml for 30 minutes, Neutral Red is proposed as a non-invasive viability assessment tool for isolated bovine preantral follicles, without compromising follicle cryotolerance.

Abstract

Purpose

Fertility preservation strategies warrant non-invasive viability assessment of preantral follicles (PAF) such as staining with Neutral Red (NR) that is incorporated by viable follicles. To optimize the procedure, we firstly determined the lowest concentration and shortest exposure time needed for optimal viability screening of isolated bovine PAF. Secondly, we combined this protocol to a vitrification procedure to assess cryotolerance of the stained follicles.

Methods

Isolated PAF (900, divided over 6 replicates) were cultured in DMEM/Ham’s F12 (Culture Medium - Cm) for 4 days (38.5 °C, 5 % CO2). On D0, D2 and D4, follicles were stained, by adding NR medium (NRm = Cm with different concentrations NR) after which viability was assessed by counting stained/non-stained PAF every 30 min for a period of 2 h.

Results

Following a binary logistic regression analysis with staining as a result (yes/no) versus log-concentration, a probability model could be fitted, indicating that the proportion of stained follicles remained stable after 30 min when 15 μg/ml NR was used, without compromising follicular health and viability. Consequently, using this protocol, no significant effect of staining prior to vitrification, was found on PAF viability immediately after warming or following 4 days of culture.

Conclusions

In conclusion, we propose NR staining as a non-invasive, non-detrimental viability assessment tool for PAF, when applied at 15 μg/ml for 30 min, being perfectly compatible with PAF vitrification.

Bitte loggen Sie sich ein, um Zugang zu diesem Inhalt zu erhalten

★ PREMIUM-INHALT
e.Med Interdisziplinär

Mit e.Med Interdisziplinär erhalten Sie Zugang zu allen CME-Fortbildungen und Fachzeitschriften auf SpringerMedizin.de. Zusätzlich können Sie eine Zeitschrift Ihrer Wahl in gedruckter Form beziehen – ohne Aufpreis.

Weitere Produktempfehlungen anzeigen
Literatur
Über diesen Artikel

Weitere Artikel der Ausgabe 12/2014

Journal of Assisted Reproduction and Genetics 12/2014 Zur Ausgabe
  1. Das kostenlose Testabonnement läuft nach 14 Tagen automatisch und formlos aus. Dieses Abonnement kann nur einmal getestet werden.

Neu im Fachgebiet Gynäkologie und Geburtshilfe

Meistgelesene Bücher aus dem Fachgebiet

2014 | Buch

Perikonzeptionelle Frauenheilkunde

Fertilitätserhalt, Prävention und Management von Schwangerschaftsrisiken

Ein Praxisbuch für alle, die in der Beratung und Betreuung von Schwangeren und Paaren mit Kinderwunsch tätig sind. Die Herausgeber und Autoren haben alle wichtigen Informationen zusammengetragen, um Frauen sicher zu beraten, zu betreuen und kompetent Verantwortung zu übernehmen.

Herausgeber:
Christian Gnoth, Peter Mallmann

2014 | Buch

Praxisbuch Gynäkologische Onkologie

Das Nachschlagewerk für alle Ärzte in Klinik und Praxis, die Patientinnen mit bösartigen Tumoren des Genitales und der Mamma behandeln. Dieses Buch gibt in kompakter Weise einfach umsetzbare Handlungsanweisungen zum diagnostischen und therapeutischen Vorgehen und Hilfestellungen für die optimale Versorgung der Patientinnen.

Herausgeber:
Edgar Petru, Walter Jonat, Daniel Fink, Ossi R. Köchli

Mail Icon II Newsletter

Bestellen Sie unseren kostenlosen Newsletter Update Gynäkologie und bleiben Sie gut informiert – ganz bequem per eMail.

Bildnachweise