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Erschienen in:

01.08.2009 | Original Article

Inhibition of Nucleostemin Upregulates CDX2 Expression in HT29 Cells in Response to Bile Acid Exposure: Implications in the Pathogenesis of Barrett’s Esophagus

verfasst von: Yong-Gang Sun, Xing-Wei Wang, Shi-Ming Yang, Gang Zhou, Wei-Qiang Wang, Hong-Bin Wang, Rong-Quan Wang, Dian-Chun Fang

Erschienen in: Journal of Gastrointestinal Surgery | Ausgabe 8/2009

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Abstract

Background

Barrett’s esophagus (BE), a squamous-to-columnar metaplasia, may originate from growth-promoting mutations in metaplastic stem cells. Nucleostemin is a protein highly expressed in undifferentiated embryonic stem cells. The objectives of this study were to explore the potential role of nucleostemin in the pathogenesis of BE

Methods

The expression profiles of 30,968 genes were compared between BE and normal esophageal tissues (n = 6 in each group) by using oligo microarray. Three siRNA plasmid expression vectors against nucleostemin, pRNAi-1, pRNAi-2, and pRNAi-3, were constructed and transfected into HT29 cells. In addition, HT29 cells were exposed to 100–1,000 μM chenodeoxycholic acid (CDC), a bile acid, for 2, 12, and 24 h, and then messenger RNA and protein expressions of nucleostemin and CDX2 were determined by reverse-transcriptase polymerase chain reaction and Western blotting.

Results

Four hundred and twenty-six differentially expressed genes were detected in BE; 142 were upregulated and 284 downregulated. Nucleostemin was downregulated while CDX2 was upregulated. In vitro, all the recombinant plasmids inhibited the nucleostemin expression in transfected HT29 cells, with pRNAi-1 being the most effective. CDX2 expression was significantly increased in pRNAi-1-transfected HT29 cells, compared with that in the empty plasmid (pRNAT-U6.1/Neo) transfected or untransfected HT29 cells. In addition, CDX2 expression was increased whereas nucleostemin expression was decreased in a dose- and time-dependent manner in HT29 cells treated with CDC.

Conclusion

These findings suggest that the inhibition of nucleostemin expression in “esophageal stem cells” in response to bile acid exposure may be involved in the pathogenesis of BE through upregulating CDX2 expression.

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Titel: Inhibition of Nucleostemin Upregulates CDX2 Expression in HT29 Cells in Response to Bile Acid Exposure: Implications in the Pathogenesis of Barrett’s Esophagus
verfasst von: Yong-Gang Sun
Xing-Wei Wang
Shi-Ming Yang
Gang Zhou
Wei-Qiang Wang
Hong-Bin Wang
Rong-Quan Wang
Dian-Chun Fang
Publikationsdatum: 01.08.2009
Verlag: Springer-Verlag
Erschienen in: Journal of Gastrointestinal Surgery / Ausgabe 8/2009
Print ISSN: 1091-255X
Elektronische ISSN: 1873-4626
DOI: https://doi.org/10.1007/s11605-009-0899-2

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