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Erschienen in: International Journal of Legal Medicine 6/2015

01.11.2015 | Technical Note

Isolating cells from female/male blood mixtures using florescence in situ hybridization combined with low volume PCR and its application in forensic science

verfasst von: Lei Feng, Cai-xia Li, Jun-ping Han, Cheng Xu, Lan Hu

Erschienen in: International Journal of Legal Medicine | Ausgabe 6/2015

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Abstract

To obtain single-source short tandem repeat (STR) profiles in trace female/male blood mixture samples, we combined florescence in situ hybridization (FISH), laser microdissection, and low volume PCR (LV-PCR) to isolate male/female cells and improve sensitivity. The results showed that isolation of as few as 10 leukocytes was sufficient to yield full STR profiles in fresh female or male blood samples for 32 independent tests with a low additional alleles rate (3.91 %) and drop-out alleles rate (5.01 %). Moreover, this procedure was tested in two fresh blood mixture series at three ratios (1:5, 1:10, and 1:20), two mock female/male blood mixture casework samples, and one practical casework sample. Male and female STR profiles were successfully detected in all of these samples, showing that this procedure could be used in forensic casework in the future.
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Literatur
1.
Zurück zum Zitat Li CX, Wang GQ, Li WS, Huang JP, Ji AQ, Hu L (2011) New cell separation technique for the isolation and analysis of cells from biological mixtures in forensic caseworks. Croat Med J 52(3):293–298PubMedCentralCrossRefPubMed Li CX, Wang GQ, Li WS, Huang JP, Ji AQ, Hu L (2011) New cell separation technique for the isolation and analysis of cells from biological mixtures in forensic caseworks. Croat Med J 52(3):293–298PubMedCentralCrossRefPubMed
2.
Zurück zum Zitat Murray C, McAlister C, Elliott K (2007) Identification and isolation of male cells using fluorescence in situ hybridisation and laser microdissection, for use in the investigation of sexual assault. Forensic Sci Int Genet 1:247–252CrossRefPubMed Murray C, McAlister C, Elliott K (2007) Identification and isolation of male cells using fluorescence in situ hybridisation and laser microdissection, for use in the investigation of sexual assault. Forensic Sci Int Genet 1:247–252CrossRefPubMed
4.
Zurück zum Zitat Li CX, Qi B, Ji AQ, Xu XL, Lan H (2009) The combination of single cell micromanipulation with LV-PCR system and its application in forensic science. Forensic Sci Int Genet Suppl Ser 2:516–517CrossRef Li CX, Qi B, Ji AQ, Xu XL, Lan H (2009) The combination of single cell micromanipulation with LV-PCR system and its application in forensic science. Forensic Sci Int Genet Suppl Ser 2:516–517CrossRef
5.
Zurück zum Zitat Pettenati MJ, Rao PN, Schnell S, Hayworth-Hodge R, Lantz PE, Geisinger KR (1995) Gender identification of dried human bloodstains using fluorescence in situ hybridization. J Forensic Sci 40:885–887CrossRefPubMed Pettenati MJ, Rao PN, Schnell S, Hayworth-Hodge R, Lantz PE, Geisinger KR (1995) Gender identification of dried human bloodstains using fluorescence in situ hybridization. J Forensic Sci 40:885–887CrossRefPubMed
6.
Zurück zum Zitat Gill P, Whitaker J, Flaxman C, Brown N, Buckleton J (2000) An investigation of the rigor of interpretation rules for STRs derived from less than 100 pg of DNA. Forensic Sci 112:17–40CrossRef Gill P, Whitaker J, Flaxman C, Brown N, Buckleton J (2000) An investigation of the rigor of interpretation rules for STRs derived from less than 100 pg of DNA. Forensic Sci 112:17–40CrossRef
7.
Zurück zum Zitat Caragine T, Mikulasovich R, Tamariz J, Bajda E, Sebestyen J, Baum H et al (2009) Validation of testing and interpretation protocols for low template DNA samples using AmpFℓSTR® Identifiler®. Croat Med J 50:250–267PubMedCentralCrossRefPubMed Caragine T, Mikulasovich R, Tamariz J, Bajda E, Sebestyen J, Baum H et al (2009) Validation of testing and interpretation protocols for low template DNA samples using AmpFℓSTR® Identifiler®. Croat Med J 50:250–267PubMedCentralCrossRefPubMed
8.
9.
Zurück zum Zitat Proff C, Rothschild MA, Schneider PM (2006) Low volume PCR (LV-PCR) for STR typing of forensic casework samples. Int Congr Ser 1288:645–647CrossRef Proff C, Rothschild MA, Schneider PM (2006) Low volume PCR (LV-PCR) for STR typing of forensic casework samples. Int Congr Ser 1288:645–647CrossRef
10.
Zurück zum Zitat Li CX, Han JP, Ren WY, Ji AQ, Xu XL, Hu L (2011) DNA profiling of spermatozoa by laser capture microdissection and low volume-PCR. PLoS One 6(8):e22316PubMedCentralCrossRefPubMed Li CX, Han JP, Ren WY, Ji AQ, Xu XL, Hu L (2011) DNA profiling of spermatozoa by laser capture microdissection and low volume-PCR. PLoS One 6(8):e22316PubMedCentralCrossRefPubMed
11.
Zurück zum Zitat Vandewoestyne M, Van Hoofstat D, Van Nieuwerburgh F, Deforce D (2009) Suspension fluorescence in situ hybridization (S-FISH) combined with automatic detection and laser microdissection for STR profiling of male cells in male/female mixtures. Int J Legal Med 123:441–447PubMedCentralCrossRefPubMed Vandewoestyne M, Van Hoofstat D, Van Nieuwerburgh F, Deforce D (2009) Suspension fluorescence in situ hybridization (S-FISH) combined with automatic detection and laser microdissection for STR profiling of male cells in male/female mixtures. Int J Legal Med 123:441–447PubMedCentralCrossRefPubMed
Metadaten
Titel
Isolating cells from female/male blood mixtures using florescence in situ hybridization combined with low volume PCR and its application in forensic science
verfasst von
Lei Feng
Cai-xia Li
Jun-ping Han
Cheng Xu
Lan Hu
Publikationsdatum
01.11.2015
Verlag
Springer Berlin Heidelberg
Erschienen in
International Journal of Legal Medicine / Ausgabe 6/2015
Print ISSN: 0937-9827
Elektronische ISSN: 1437-1596
DOI
https://doi.org/10.1007/s00414-014-1103-0

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